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當前位置：金年会 > > 產品中心 > > 金年会液相色譜分析儀分析水產品中呋喃唑酮殘留量的測定液相色譜法

LC-901型液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與***液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。

原理

樣品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取，蒸發濃縮提取液，無水硫酸鈉去除水分，用正己烷液-液萃取除去脂肪及其他雜質，離心，取下層清液經膜過濾器后用高效液相色譜儀分離，紫外檢測器檢測，外標法定量。

試劑和材料

乙腈：色譜純。

二氯甲烷：色譜純。

正己烷：分析純，用乙腈飽和。

85%磷酸：分析純。

乙腈水溶液：乙腈+水（體積分數為80+20）。

無水硫酸鈉：分析純，經640℃灼燒4.0h后，貯于密閉容器中備用。

無水硫酸鈉柱：200 mm×24 mm（id），內裝50 mm~100 mm高的無水硫酸鈉。

呋喃唑酮標準品：純度≥99.5%。

呋喃唑酮標準貯備液：稱取10.0 mg呋喃唑酌，用乙腈水溶液溶解并稀釋定容至50 mL棕色容量瓶中，在冰箱中冷藏保存，保存期1個月。該液1 mL相當于200μg呋喃唑酮。

試驗用水：符合GB/T 6682一級水標準。

儀器和設備

高效液相色譜儀（LC-901型，金年会·(中国)官方网站）， 配有紫外檢測器。

高速組織搗碎機。

旋轉蒸發儀。

離心機。

振蕩器。

蒸發燒瓶，具塞。

刻度離心管。

膜孔濾器：0.45μm。

色譜條件

色譜柱：C18柱， 250 mm×4.6mm（id），粒度5μm。

流動相：乙腈+水+磷酸（體積分數為40+60+0.1）。

流速： 0.8 mL/min。

檢測波長：365 nm。

柱溫：室溫。

進樣量：20 μL。

樣品測定

試樣制備

取魚、蝦、蟹、鱉等水產品可食部分，切成不大于5 mm×5 mm×5 mm的小塊后混勻，經高速組織搞碎機搗碎即可，充分混勻。

提取

稱取搗碎樣品約10g （粘確至0.01 g），加25 mL二氯甲烷攪拌分散后浸泡15min， 在振蕩器上振蕩5 min，提取液經無水硫酸鈉柱濾入蒸發燒瓶中，殘渣分別用25 mL和15 mL二氯甲烷按上述方法各重復提取一次，再用15 mL二氯甲烷沖洗無水硫酸鈉柱，并用洗耳球吹出柱中液體，濾液均濾入同一蒸發燒瓶中，濾液于旋轉蒸發儀上在45℃左右水浴下減壓蒸發去除溶劑，蒸發速度控制在每秒一滴。

凈化

用1.0mL流動相和1.0mL正己烷溶解殘渣并充分洗滌蒸發燒瓶，將液體移入離心管中，在

4 000 r/min離心5min，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，再向離心管中加入1.0mL正己烷。混勻2min，商心，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，下層清液經0.45μm膜孔濾器過濾后進HPLC分析。

 測定

呋喃唑酮標準工作液配制

臨用前，取呋喃唑酮標準貯備液，用流動相稀釋成濃度為0.01μg/mL~1.00μg/mL的標準工作液。

液相色譜測定

根據樣品液中呋喃唑酮殘留量情況，選定峰高相近的標準工作溶液。標準工作溶液和樣品液中呋哺唑酮響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標準工作溶液和樣品液等體積參插進樣進行測定。在上述色譜條件下，呋喃唑酮保留時間約為5.8 min。

LC-901型液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜(LLC）及液-固色譜(LSC）。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與***液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。

原理

樣品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取，蒸發濃縮提取液，無水硫酸鈉去除水分，用正己烷液-液萃取除去脂肪及其他雜質，離心，取下層清液經膜過濾器后用高效液相色譜儀分離，紫外檢測器檢測，外標法定量。

試劑和材料

乙腈：色譜純。

二氯甲烷：色譜純。

正己烷：分析純，用乙腈飽和。

85%磷酸：分析純。

乙腈水溶液：乙腈+水（體積分數為80+20）。

無水硫酸鈉：分析純，經640℃灼燒4.0h后，貯于密閉容器中備用。

無水硫酸鈉柱：200 mm×24 mm（id），內裝50 mm~100 mm高的無水硫酸鈉。

呋喃唑酮標準品：純度≥99.5%。

呋喃唑酮標準貯備液：稱取10.0 mg呋喃唑酌，用乙腈水溶液溶解并稀釋定容至50 mL棕色容量瓶中，在冰箱中冷藏保存，保存期1個月。該液1 mL相當于200μg呋喃唑酮。

試驗用水：符合GB/T 6682一級水標準。

儀器和設備

高效液相色譜儀（LC-901型，金年会·(中国)官方网站）， 配有紫外檢測器。

高速組織搗碎機。

旋轉蒸發儀。

離心機。

振蕩器。

蒸發燒瓶，具塞。

刻度離心管。

膜孔濾器：0.45μm。

色譜條件

色譜柱：C18柱， 250 mm×4.6mm（id），粒度5μm。

流動相：乙腈+水+磷酸（體積分數為40+60+0.1）。

流速： 0.8 mL/min。

檢測波長：365 nm。

柱溫：室溫。

進樣量：20 μL。

樣品測定

試樣制備

取魚、蝦、蟹、鱉等水產品可食部分，切成不大于5 mm×5 mm×5 mm的小塊后混勻，經高速組織搞碎機搗碎即可，充分混勻。

提取

稱取搗碎樣品約10g （粘確至0.01 g），加25 mL二氯甲烷攪拌分散后浸泡15min， 在振蕩器上振蕩5 min，提取液經無水硫酸鈉柱濾入蒸發燒瓶中，殘渣分別用25 mL和15 mL二氯甲烷按上述方法各重復提取一次，再用15 mL二氯甲烷沖洗無水硫酸鈉柱，并用洗耳球吹出柱中液體，濾液均濾入同一蒸發燒瓶中，濾液于旋轉蒸發儀上在45℃左右水浴下減壓蒸發去除溶劑，蒸發速度控制在每秒一滴。

凈化

用1.0mL流動相和1.0mL正己烷溶解殘渣并充分洗滌蒸發燒瓶，將液體移入離心管中，在

4 000 r/min離心5min，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，再向離心管中加入1.0mL正己烷。混勻2min，商心，用尖嘴吸管移去上層正己烷層，下層清液經0.45μm膜孔濾器過濾后進HPLC分析。

測定

呋喃唑酮標準工作液配制

臨用前，取呋喃唑酮標準貯備液，用流動相稀釋成濃度為0.01μg/mL~1.00μg/mL的標準工作液。

液相色譜測定

根據樣品液中呋喃唑酮殘留量情況，選定峰高相近的標準工作溶液。標準工作溶液和樣品液中呋哺唑酮響應值均應在儀器檢測線性范圍內。對標準工作溶液和樣品液等體積參插進樣進行測定。在上述色譜條件下，呋喃唑酮保留時間約為5.8 min。